兔核因子κB受體活化因子配基檢測試劑盒

規(guī)格：96T/48T

用途：用于檢測血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液等樣本中兔核因子κB受體活化因子配基(RANKL)的濃度。

使用前請仔細閱讀說明書。如果有任何問題，請聯(lián)系我們

具體保質期請見試劑盒外包裝標簽。請在保質期內使用試劑盒。聯(lián)系時請?zhí)峁┊a品貨號、生產日期（見盒簽），以便我們更高效為您服務。

【試劑盒性能】

物理性能：各液體組分澄清透明、無沉淀或者絮狀物。微孔板鋁箔袋應真空包裝，無破損漏氣。

校準曲線線性：校準品劑量反應曲線相關系數(shù) r 值，大于等于 0.9900。精密度：批內變異系數(shù) CV%小于 10%；批間變異系數(shù) CV%小于 15%。

回收率：回收率在 85%-115%之間。

敏感性：本試劑盒識別兔核因子κB受體活化因子配基(RANKL)，與結構類似物無交叉。

穩(wěn)定性：2℃-8℃保存，有效期 6 個月。

【實驗原理】

兔核因子κB受體活化因子配基檢測試劑盒應用雙抗原夾心法測定標本中指標表達。用純化的抗原包被微孔板，制成固相抗原，可與樣品中指標相結合，經過徹-底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成最終的黃色。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值）與待測樣品中兔核因子κB受體活化因子配基(RANKL)的濃度正相關。擬合校準品曲線，可以計算出樣本中兔核因子κB受體活化因子配基(RANKL)的濃度。

【試劑盒組成】

注意：

1、使用前請檢查試劑盒中試劑的標簽和數(shù)量與表格是否一致。

2、試劑盒 2-8℃保存，不得使用過期試劑盒。

3、包被微孔板單次未使用完，要謹記密封放到 2-8℃保存。

4、如果試劑盒的組份需要再次使用，請確保上一次使用之后沒有被污染。

【樣品的準備和保存】

以下只是列出樣品采集和保存的一般指南。所有樣本采集保存過程中， 不得使用疊氮鈉做為防腐劑。樣品如果不立即分析，應分裝后冷凍保存， 且避免反復凍融。

細胞培養(yǎng)上清：離心去除沉淀，立即分析或分裝后-20℃冷凍保存。

血清：用干凈試管收集血液，室溫凝固 30 分鐘，離心 2000×g 20 分鐘，收集血清。立即分析或分裝后-20℃冷凍保存。

血漿：采用肝素、檸檬酸鹽或 EDTA 抗凝，抽血后 30 分鐘內在2-8℃離心 2000×g 20 分鐘。為消除血小板的影響，建議在 2-8℃進一步離心 10000×g 10 分鐘。立即分析或分后-20℃冷凍保存。

細胞裂解液：對于貼壁細胞，去除培養(yǎng)液，用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。加入適量裂解液，用移液器吹打數(shù)下，使裂解液和細胞充分接觸。通常 10 秒后，細胞就會被裂解。對于懸浮細胞，離心收集細胞，用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。加入適量裂解液，用移液器吹打把細胞吹散，用手指輕彈以充分裂解細胞。充分裂解后，10000—14000×g 離心 3-5 分鐘， 取上清。立即分析或分裝后-20℃ 冷凍保存。

尿液：用無菌管收集，離心 2000×g 20 分鐘。仔細收集上清。如有沉淀形成，應再次離心。

【注意事項】

1、本試劑盒僅供體外研究使用，不用于臨床診斷。

2、試驗中請穿著實驗服并戴乳膠手套做好防護工作。特別是檢測血液或者其他體液樣品時，請按國家生物試驗室安全防護條例執(zhí)行。

3、嚴格按照規(guī)定的時間和溫度進行溫育以保證準確結果。所有試劑都必須在使用前達到室溫 20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。

4、洗板不正確可能導致不準確的結果。在加入底物前確保盡量吸干孔內液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。

5、消除板底殘留的液體和手指印，否則影響 OD 值。

6、底物顯色液應呈無色或很淺的顏色。

7、避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結果。

8、在儲存和溫育時避免強光直接照射。

9、平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。

10、任何反應試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應試劑的生物活性。

11、檢測使用的酶標儀需要安裝能檢測 450±10nm 波長的濾光片，

光密度范圍在 0-3.5 之間。建議使用時提前 15 分鐘預熱。

12、請勿使用其他批號或其他來源的試劑混合或替代本試劑盒中的試劑。

13、試驗中所用的 EP 管和吸頭均為一次性使用，嚴禁混用。

14、請勿使用過期的試劑。

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