豬偽狂犬病毒gE蛋白抗體檢測試劑盒

豬偽狂犬病毒gE蛋白抗體檢測試劑盒?
臨床意義
      偽狂犬病毒gE蛋白抗體檢測試劑盒用于檢測豬血清中抗偽狂犬病毒gE蛋白的抗體。用于區(qū)別臨床野毒感染豬和用gE基因缺失疫苗免疫的豬。?
試劑組成

操作程序
1.洗滌液配制：使用前，濃縮的洗滌液應(yīng)恢復(fù)至室溫（25℃左右）,并搖動使沉淀的鹽溶解（在37℃水中加熱5-10），然后用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋，稀釋好的洗滌液在4℃可以存放7天。

?2.樣本稀釋：用樣本稀釋液（5號液）將待檢血清按1:40稀釋，如取5ul血清與195ul樣本稀釋液，充分混勻；注意：陽性對照和陰性對照也按1：40稀釋。 

3.加樣反應(yīng)：取出所需反應(yīng)板條，將稀釋好的待檢血清取100μl加入到檢測板孔中。陰性對照和陽性對照各設(shè)2孔，每孔100μl。輕輕振勻孔中樣品（勿溢出），置37℃溫育30分鐘。甩掉板孔中的溶液，用洗滌液洗板5次，200μl/孔，每次靜置3分鐘倒掉，再在干凈吸水紙上拍干。

?4.加酶反應(yīng)：每孔加酶結(jié)合物（1號液）2滴（100μl），置37℃溫育30分鐘。洗滌5次, 方法同3。切記每次在干凈吸水紙上拍干。

?5.顯色反應(yīng)：每孔先加底物（3號液）一滴（50µl）、再加顯色劑（4號液）一滴（50µl），混勻，室溫（18℃-25℃）避光顯色10分鐘。每孔加終止液（6號液） 1滴（50μl），10分鐘內(nèi)測定結(jié)果（檢測前在震蕩器上輕輕震動一下）。

結(jié)果判斷
1．肉眼觀察：陰性對照接近無色，陽性對照呈明顯黃色，表示試驗有效。待檢孔接近無色表示該標(biāo)本為陰性，待檢孔呈明顯黃色表示該標(biāo)本為陽性。
2．儀器判斷：以空白對照調(diào)零用酶標(biāo)儀于450nm（620nm作參比波長）讀取O.D值，待檢孔O.D值大于陰性對照2.1倍者為陽性。當(dāng)陰性對照O.D值低于0.08時按0.08計算。
 

注意事項
1.試劑盒在2-8℃下保存，每次取出時先平衡至室溫后使用。滴瓶每次用后一定要將蓋擰緊，各瓶蓋之間切不可混用。各試劑盒之間不可混用。
2.洗滌時將蒸餾水加滿孔內(nèi)，每次停放三十秒鐘，甩去孔內(nèi)液體。禁用自來水等其它水源。
3.為提高試驗的可比性，建議使用儀器判讀結(jié)果。
4.如有條件，使用水浴箱孵育。

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