熒光PCR試劑盒又可以分為探針和熒光染料兩種方法。比較而言，探針雜交技術(shù)在原理上更為嚴(yán)格，所得數(shù)據(jù)更為；熒光染料技術(shù)則成本更為低廉，實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)更為簡(jiǎn)便。在選擇實(shí)驗(yàn)方案時(shí)要根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮蛯?duì)數(shù)據(jù)精度的要求來(lái)決定。
一般說(shuō)來(lái)，應(yīng)選用口碑較好的經(jīng)過(guò)大量客戶實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證的熒光PCR試劑盒，因?yàn)橹挥羞x對(duì)了試劑盒才能夠做成漂亮的實(shí)驗(yàn)結(jié)果來(lái)，特別是對(duì)于一些珍貴的樣品更不能因?yàn)楣?jié)約一些蠅頭小利而毀了樣品本身。熒光PCR試劑盒在研發(fā)之初就考慮到了一般科研環(huán)境中方方面面的影響，例如我們就光照強(qiáng)度、光照時(shí)間對(duì)本產(chǎn)品的影響做了嚴(yán)苛的實(shí)驗(yàn)論證，得到1ml本產(chǎn)品盛裝于1.5ml離心管中放置在光照強(qiáng)度下可以保存12h，超過(guò)12h產(chǎn)品性能則會(huì)下降。
熒光PCR試劑盒這款試劑盒除了價(jià)格適中外，還主要有以下優(yōu)點(diǎn)：
1、適用于熒光PCR試劑盒反應(yīng)，可以快速、準(zhǔn)確地對(duì)目的基因進(jìn)行定量檢測(cè)。
2、在熒光PCR試劑盒中，預(yù)先混有SybrGreen，PCR體系配制時(shí)只需入模板、引物、ddH2O即可，操作方便快捷。
3、含有更耐高溫并持續(xù)穩(wěn)定，可以維持更多的循環(huán)數(shù)，提供了選擇循環(huán)數(shù)更大的空間。更大的Ct值選擇范圍就意味著可以支持微量目的基因檢測(cè)，檢測(cè)范圍fM-nM。
4、反應(yīng)的Buffer更適合，使反應(yīng)的基線更水平，無(wú)熒光污染信號(hào)。使線性期更陡峭，避免了Ct值的無(wú)效浮動(dòng)。使平臺(tái)期更平直。也確保了引物與模板能夠更特異地結(jié)合。
5、熒光PCR試劑盒更耐高溫更足量，確保只要擴(kuò)增反應(yīng)在進(jìn)行，目的DNA雙鏈在增加，就有線性強(qiáng)度的熒光產(chǎn)生。
6、dNTPs更足量，確保反應(yīng)有更高的平臺(tái)期熒光信號(hào)。
7、Mg2+濃度更適合，確保線性期有爆發(fā)式的目的DNA片段合成，提高了線性期反應(yīng)體系的擴(kuò)增系數(shù)和線性期的長(zhǎng)度。
8、更高的儀器適配性，熒光PCR試劑盒染料可以被各大主流儀器的激發(fā)光所激發(fā)，產(chǎn)生明亮的熒光信號(hào)，有利于儀器對(duì)信號(hào)的捕捉和處理。
